쌀가루의 입자크기가 글루텐 프리 쌀 식빵 제조에 미치는 영향

실험에 사용한 쌀 품종 설갱은 농촌진흥청 국립식량과학원 에서 지원받아 사용하였으며 기류식 제분기(Air-Classification Mill)를 이용하여 5마력 3.75 kw 조건으로 건식 제분하여 사 용하였다. 쌀가루 입자크기는 각각 100, 200, 300 mesh 체 를 통과시켜 분류하였으며 글루텐 프리 쌀 식빵 제조에 필 요한 재료로 소금(Daesang Co., Ltd., Muan, Korea), 설탕 (Samyang Co., Ltd., Ulsan, Korea), 카놀라유(Cheiljedang Co., Ltd., Incheon, Korea), 인스턴트 이스트(Saf-instant, Lesaffre, Lille, France)는 시중에서 구입하여 사용하였고 hydroxypropyl methylcellulose(HPMC)는 삼성정밀화학에서 제공받아 사용하였다.

글루텐 프리 쌀 식빵 제조는 Hera의 방법(Hera et al., 2013)을 참조하여 직접 반죽법으로 Kitchen-Aid Professional mixer(Kitchen Aid Mixer, St Joseph, MI, USA)를 이용하여 제조하였다. 글루텐 프리 쌀 식빵 배합비는 쌀가루 600 g, 인스턴트 이스트 18 g, 소금 12 g, 설탕 30 g, 카놀라유 36 g, HPMC 24 g으로 결정하였다. 제빵과정에서 쌀가루의 입자크 기는 반죽을 형성하기 위한 가수량에 영향을 미친다. 따라서 유사한 물성의 반죽을 형성하기 위한 예비 실험을 진행하 였으며, 적합한 첨가되는 물 함량은 쌀가루 입도에 따라 100, 200, 300 mesh 각각 420 g, 480 g, 540 g(쌀가루 대비 각각 70, 80, 90%)으로 결정하였다. 쌀가루와 HPMC를 1 분간 혼합하고 설탕, 소금, 이스트를 물과 함께 2분간 혼 합한 후 카놀라유를 넣고 6분간 혼합하였다. 완성된 반죽을 170 g씩 분할한 후 지름 5 cm 높이 9 cm인 원통형태로 동 일하게 성형하였다. 완성된 반죽을 틀에 넣고 온도 30°C, 습도 90%로 미리 설정해 놓은 발효기에서 40분간 발효한 후 윗불 185°C, 아랫불 185°C로 예열된 전기오븐(Daeyoung Co., Anshan, Korea)에서 25분간 구워 글루텐 프리 쌀 식 빵을 제조하였다. 제조된 쌀 식빵은 1시간 동안 실온에서 방랭한 후 플라스틱 팩에 넣어 데시케이터에 보관하였고 24시간 이내에 모든 측정을 완료하였다.

제분된 쌀가루의 형태 분석을 위해 scanning electron microscope(S-4300, Hitachi, Tokyo, Japan)를 이용하여 가 속 전압 15 kV에서 300배로 확대하여 관찰하였다.

아밀로오스 함량 분석은 Juliano의 비색정량법(Juliano, 1985)에 따라 쌀가루 100 mg에 95% ethanol과 1 N 수산화 나트륨을 가하고 100°C에서 10분 간 호화 시킨 후 냉각 시킨다. 호화액에 1 N 아세트산과 2% I₂-KI 용액을 첨가하 여 정색반응을 시킨 후 분광광도계(Evolution 500, Thermo Fisher Scientific Inc., Waltham, MA, USA)를 이용한 620 nm 의 파장에서의 흡광도를 측정하고, 표준 곡선을 이용하여 아밀로오스 함량을 계산하였다.

쌀가루의 입자크기를 측정하기 위해 Malvern 입도분석기 (Mastersizer 2000, Malvern Instruments, Worcestershire, UK)로 측정하였다. 측정을 위한 분산용매는 에탄올을 이용 하였으며, 0.03% 쌀가루 농도 조건으로 측정하였으며 이를 평균입자크기(μm)로 나타내었다.

쌀가루 손상전분 함량은 AACC method 76-31에 의한 손 상전분 분석 키트(Megazyme International Ltd., Wicklow, Ireland)를 사용하여 측정하였다.

쌀 식빵의 비체적은 부피측정기(VSP600, Stable Micro System Ltd., Surrey, UK)를 이용하여 측정하였다. 쌀 식빵 을 측정장치에 수직으로 넣은 후 스캔 간격 1 mm 로 설정 하여 6회 반복 측정하여 부피(mL)와 무게(g)의 비로 나타 내었다.

쌀 식빵의 crumb 부분의 경도를 측정하기 위해 texture analyzer(TMS-Pro, Food Technology Co., Sterling, VA, USA)를 사용하였다. 제조된 식빵을 두께 2 cm로 자르고 플 랫폼 위에 올려 놓은 후 지름 20 mm 플라스틱 프로브 (probe)로 변화율 50%, 프로브 이동속도 20 mm/min 조건으 로 압축하여 측정하였다. 나타난 그래프에서 최고점을 경도 (hardness)로 나타냈었다.

색차계(CR-300, Minolta Co., Ltd., Osaka, Japan)를 이용 하여 제조된 쌀 식빵의 Crust 부분을 측정하여 L (명도), a (적색도), b (황색도) 값으로 나타내었다. 6회 반복 측정하 였으며 이때 색차계의 표준값은 L=98.07, a=0.18, b=1.57 이었다.

식빵 crumb 구조 및 쌀 식빵 형태를 알아보기 위해 시 료의 가장 높은 위치에서 단면 방향으로 시료를 자른 후 식빵을 스튜디오에 올려놓은 후 형광등을 킨 상태에서 디 지털카메라를 이용하여 촬영하였다.

본 연구에서 얻어진 자료는 평균과 표준편차로 나타내었 으며 통계분석은 SAS(SAS v. 9.1, SAS Institute, Inc., Cary, NC, USA) 통계 프로그램을 이용하여 실시 하였다. 모든 분 석은 3회 이상 실시하였고, 각 Table 1에는 평균과 표준편차 로 나타내었다.

쌀가루의 입도에 따른 성분 변화를 분석하고자 쌀가루의 수분함량, 단백질, 아밀로오스, 손상전분함량, 입자크기를 분석하여 Table 2에 나타냈다. 입도에 따른 수분함량은 약 13%로 유의적인 차이를 보이지 않았다. 100 mesh체를 통 과한 쌀가루와 200 mesh체를 통과한 쌀가루의 아밀로오스 함량은 19.5%, 19.6%로 유의적인 차이를 나타내지 않았고 300 mesh체를 통과한 쌀가루의 경우 18.7%로 낮게 측정되 었다. 쌀 식빵을 제조하는데 있어 아밀로오스 함량은 중요 한 요소이며 중간 정도의 아밀로오스 함량이 가장 적합하 다고 보고되고 있다(Han et al., 2012). 100, 200, 300 mesh 체를 통과한 쌀가루 모두 적합한 것으로 사료된다. 100, 200, 300 mesh 체를 통과한 쌀가루의 단백질 함량은 각각 7.4, 5.7, 5.7%로 측정되었다. 쌀 단백질은 대부분 소수성 이며 물에 팽윤되지 않는 특성이 있어 쌀 식빵 제조 시 단백질함량이 낮을수록 제빵 적성에 적합하다고 보고되고 있다(Lumdubwong & Seib, 2000). 단백질함량의 경우 입 자크기가 미세할수록 감소하는 경향을 보이는데 200 mesh 와 300 mesh 체를 통과한 쌀가루가 제빵적성에 적합할 것 으로 판단된다. 손상전분함량의 경우 입도별로 각각 4.8, 5.0, 9.0%로 나타났다. 설갱의 경우 쌀알의 경도가 일반적 인 쌀 품종과 달리 낮아 쌀가루로 제분 시 전분의 손상을 최소화하며 제분 할 수 있는 특징이 있다(Yoon et al., 2011). 손상전분함량은 쌀 식빵의 비체적과 부의 상관관계를 보이 는데(Araki et al., 2009) 100mesh와 200mesh 체를 통과한 쌀가루는 300mesh 체를 통과한 쌀가루 보다 큰 부피를 갖 는 쌀 식빵이 제조될 것으로 판단된다. 200 mesh 체를 통과 한 쌀가루의 경우 낮은 단백질함량, 중간 아밀로오스 함량, 손상전분을 최소화하며 미세하게 제분되는 특징이 있어 제 빵 적성에 적합할 것으로 판단된다.

100, 200, 300 mesh 체를 통과한 쌀가루의 평균입자크기 는 각각 96.9, 63.5, 28.3 μm로 통과하는 체의 크기에 따라 작아지는 것을 확인할 수 있었다. 쌀가루를 이용한 제품에 서 가루의 입자크기는 반죽 및 최종 제품의 특성에 영향을 미치는 중요한 요소이다(Hera et al., 2013). 본 실험에서 글루텐 대체재로 사용한 HPMC는 열에 안정한 네트워크를 형성하여 빵의 크기를 유지하며 수분함량을 유지할 수 있 는 능력을 갖는다(Bell, 1990). SEM 측정결과 100 mesh 체를 통과한 쌀가루 입자는 100 μm 이상의 쌀가루도 관찰 되는 것을 확인할 수 있는데(Fig. 1A) 이러한 큰 입자의 쌀가루는 HPMC의 네트워크 형성을 방해하고(Hera et al., 2013) 또한, 전분이 호화 되는데 있어 오랜 시간과 높은 온도를 필요로 하게 된다(Kadan et al., 2008). 이로 인해 100 mesh 체를 통과한 쌀가루를 이용하여 제조된 쌀 식빵 은 작은 부피와 crumb 내 균일하지 못한 기공을 갖게 될 것으로 사료된다. 200 mesh 체를 통과한 설갱 쌀가루는 HPMC의 네트워크 형성을 방해하지 않을 만큼 미세하고 (Fig. 1B), 100 mesh 체를 통과한 쌀가루와 비슷한 수준의 손상전분함량을 가져 제빵 적성에 유리할 것으로 생각된다. 반면 SEM 사진에서 300 mesh 체를 통과한 쌀가루의 관찰 결과 10 μm 수준의 매우 미세한 입자가 많이 관찰되는 것 을 확인할 수 있는데(Fig. 1C), 이는 쌀가루의 표면적의 증 가 및 높은 손상전분 함량으로 반죽 제조 시 물을 과량 (90%)으로 첨가해야만 반죽이 형성되는데 이로 인해 반죽 이 부풀지 못하고 빵의 부피가 작아진 것으로 판단된다. 이는 미세한 가루입자에서 반죽 발효 시 가장 적은 가스 발생량을 나타내며 낮은 비체적을 갖는 빵이 제조되었다는 Hera의 연구와 유사한 결과를 나타냈다(Hera et al., 2013). 쌀알의 경도가 낮은 설갱은 200 mesh 체를 통과하는 미세 한 쌀가루로 분쇄되는데 있어서도 전분에 손상을 적게 주 며 반죽 내 HPMC의 네트워크 형성을 방해지 않아 빵을 만드는데 적합한 성질을 가질 수 있는 것으로 보인다.

Fig. 1. SEM images of the size-different rice flours passed through (A) 100, (B) 200 and (C) 300 mesh sieves.

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100, 200, 300 mesh 체를 통과한 쌀가루로 제조된 쌀가 루로 제조한 글루텐 프리 쌀 식빵의 비체적은 각각 3.19, 3.36, 1.41 mL/g으로 측정되었다. 100 mesh 체를 통과한 쌀 가루로 제조한 쌀 식빵은 비교적 큰 입자크기를 갖는데 쌀 가루의 큰 입자크기는 HPMC의 네트워크 형성을 방해하여 발효 시 이스트에 의해 생성되는 이산화탄소 가스를 반죽 내에 온전히 포함할 수 없고 그로 인해 부피가 작게 나타 나고 crumb 내 불균일한 기공이 생성된 것으로 보인다. 200 mesh 체를 통과한 쌀가루는 미세한 입자를 가져 HPMC의 네트워크 형성에 영향을 미치지 않고, 이러한 미 세한 쌀가루는 빵 제조 시 첨가되는 물과 상호작용에서 넓 은 비표면적을 가져 수화가 잘 일어나고 빠르게 전분의 호 화과정이 진행되므로(Ashida et al., 2009), 가장 큰 비체적 을 갖게 되는 것으로 판단된다. 반면 300 mesh 체를 통과 한 쌀가루로 제조된 쌀 식빵의 경우 매우 낮은 비체적을 갖는데, 이는 제분 과정 중에 과도한 전분의 손상으로 인 해 반죽 발효 시 효모의 아밀레이스에 의해 상대적으로 많 은 덱스트린이 생성되고 과도한 양의 덱스트린은 반죽의 water holding ability에 영향을 미쳐 sticky한 반죽이 생성 된 것으로 생각된다. 이로 인해 발효 공정 중 이스트가 생 성하는 이산화탄소 가스에 의해 반죽이 부풀지 못하고 작 은 부피를 나타내는 것으로 판단된다(Gabriela et al., 2007). 또한 매우 작은 입자로 구성된 반죽의 구조는 쉽게 붕괴되어 발효 시 부피가 증가하지 못한다는 연구결과와 유사한 결과를 나타냈다(Hera et al., 2013). 각각의 쌀가루 로 제조한 쌀 식빵 crumb의 경도는 5.83, 2.61, 11.56 N으로 측정되었다. 비체적은 crumb의 경도에 영향을 미치는데 비 체적이 감소하면 crumb의 경도는 높아진다(Moore et al., 2006). 가장 큰 비체적을 갖는 200 mesh를 통과한 쌀가루로 제조한 쌀 식빵이 가장 낮은 crumb의 경도를 갖는 것으로 분석되었다. 쌀 식빵 crust의 명도는 각각 70.59, 73.72, 81.03으로 모두 밀가루를 이용하여 제조한 식빵의 명도 값 인 65.65에 비해 상대적으로 높은 값을 갖는 것으로 나타났 다. 이는 글루텐 대체재인 HPMC가 메일라드반응과 카라멜 화반응에 영향을 미친 것으로 보인다(Mezaize et al., 2009). 유제품 가루를 첨가한 글루텐 프리 쌀 식빵의 경우 crust의 명도가 낮아 비교적 어두운 색을 보이는데 이러한 보완이 필요할 것으로 판단된다(Gallagher et al., 2003).

쌀가루 입자크기가 쌀 식빵의 외관에 미치는 영향을 비 교하기 위해 제조된 글루텐 쌀 식빵의 사진을 찍어 외관의 모습은 Fig 3인듯에 나타냈다. 제조된 빵의 crumb의 기공 의 크기, 형태 등은 빵의 품질을 결정하는 중요한 요소이 다(Hayman et al., 1998). Crumb의 단면을 관찰한 단면을 관찰한 결과는 Fig.2 인듯의 결과에서 보듯이, 100 mesh 체를 통과한 쌀가루로 제조한 쌀 식빵의 경우 crumb 내 기공이 일정하지 않으며 큰 구멍이 관찰된다. 또한 crust에 갈라짐 현상이 발생하는 특징을 보였으며, 300 mesh 체를 통과한 쌀가루로 제조한 쌀 식빵의 경우 발효과정에서 충 분히 부풀지 못해 기공이 적고 치밀한 구조를 나타내 제빵 적성에 적합하지 않은 것으로 사료된다. 반면 200 mesh 체 를 통과한 쌀가루로 제조한 쌀 식빵은 가장 큰 부피와 비 교적 균일한 기공형태 및 분포를 나타내는 것을 확인할 수 있다.

Fig. 2. Cross section images of gluten-free rice breads prepared with the size-different rice flours passed through (A) 100 and (B) 300 mesh sieves.

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Fig. 3. Overall appearances of gluten-free rice breads prepared with the size-different rice flours passed through (A) 100, (B) 200 and (C) 300 mesh sieves.

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