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서 론
생명공학(biotechnology)의 발전과 함께 생물체에 의해서 생산되는 생물고분자, 특히 탄수화물 고분자와 이의 유도 체들인 다당류는 일반적으로 10개 이상의 단당 그리고 여 기에 우론산(uronic acid) 등의 유기산이나 아미노당 등으 로 수식 된 생체 고분자 화합물이다. 분자량, 구성당의 종 류, 결합순서, 결합양식, 결합위치 및 분지(branching) 유무 등에 따라 많은 종류가 존재하며 그 기원에 따라 식물, 동 물 및 미생물 다당류로 구분한다(Sinskey et al., 1986). 이 들 생물고분자는 주로 식물 및 미생물에 의해서 생합성 되 는데 미생물이 생산하는 다당류 또는 이의 유도체는 이미 알려진 식물 또는 해조류 유래의 천연다당류나 기타 합성 고분자와는 달리 독특한 기능성과 생리활성을 나타내며 적 당한 생산균주의 선택 및 배양방법의 개발로 대량생산이 가능하여 산업적으로 많은 관심을 받고 있다. 특히 바이 오 의약품의 응용은 물의 rheology를 바꿀 수 있는 능력 이나 그들의 특수한 생물학적 활성에 의존되는 데, 이러 한 연구들은 미생물학, 미생물 유전학, 재조합 DNA 기술 과 같은 새로운 미생물학적 기술의 인식에 기초를 두고 있기 때문에 다당류 용액의 점성(viscosity)에 높은 관심을 가지고 있다. Biopolymer들은 특수한 조건하에서 water holding capacity, moisturizing effect, thickenning, lubrication, adhesion, coating, drag reduction, shape retention 등과 같은 기능적 특성을 갖는다(Mitchell, 1980). Hyaluronic acid 는 안과 수술용 viscosurgery 및 류마티스 치료의 lubricant 로 이용될 수 있으며, Pseudemonas elodea로 부터 생산되 는 gellan gum은 신규 hetero 다당으로 agar 대용의 겔화 제로서 사용될 수 있다. 그리고 gellan gum과 유사한 구조 인 wellan 및 rhamsan gum도 각각 안정제 및 비료 현탁 제로의 용도가 개발되었고, Leuconostoc mesenteroids의 유 전자 조작에 의한 변이주로부터 생산한 Dextran (R4)도 식 품, 화장품, 의약품등에서 우수한 성능의 신소재로서 사용 될 수 있음이 밝혀졌다. 다당류는 젤형성능, 유화안정력 및 표면장력의 조절능, 물흡수능, 접착능, 필름형성능 등의 광 범위한 기능특성을 가지며 수용액의 rheology적 성질을 크 게 변화시킴으로서 그 특성에 따라 각종 공업에서 광범위 하게 사용되고 있다. 선박의 난류억제(drag reduction), 대 규모 집적회로에서의 광저항성(photo-resist) 및 초전도 복 합소재(super conducting composite material)에도 응용되고 있다. 또 상처치료, 암 치료 및 각종 세균 질병의 진단 예 방과 관련되는 바이오 의약품의 소재와 같은 부가가치성 높은 용도적성도 발견되어 그 중요성은 더욱 고조되고 있 다(Sandford & John, 1982;Wang et al., 2016). 새로운 생 물고분자 생산에 관한 연구는 유용물질생산의 국산화 측면 에서는 물론, 신물질 개발의 균형 있는 발전을 위해서도 그 필요성은 매우 높다고 할 수 있다. 본 연구는 Bacillus polymyxa YU-101 균주로부터 생합성 된 생물고분자의 물 성특성을 파악하기 위하여 수행된 것이다.
재료 및 방법
본 실험에 사용한 전배양 및 생산용 배지는 가용성 전분 2%, soybean meal 1%, KH2PO4 0.2%, MgSO4 0.1%, NaCl 0.2%, CaCO3 0.2%로 조성한 배지를 121ºC에서 15 분간 가압 살균하여 사용하였다. 접종균의 전배양은 균주 를 배지 20 mL를 함유한 100 mL 삼각플라스크에 1 백금 이 접종하고 30ºC에서 12시간 진탕배양 하였다. 본 배양은 생산용 배지 50 mL를 함유한 250 mL 삼각플라스크에 전 배양액을 3%(v/v) 접종한 후, 30ºC에서 120 rpm으로 2일 간 진탕배양 하면서 행하였다.
배양액을 3배 희석하고 9,000 g의 원심력으로 60분간 원 심분리 하여 균체를 제거하였다. 상등 액에 3배 부피의 isopropyl alcohol (IPA)를 첨가하여 교반으로 휘저으면서 고점성의 섬유상 집합체를 얻은 후 vacuum으로 건조하고 반복과정을 한 번 더 거친 후 crude biopolymer로 하였다 (Minakami et al., 1984).
시료 액의 용액특성 측정은 4-80ºC로 유지한 항온수조 (ThermoFisher Scientific SC160, Waltham, MA, USA)에 모세 관 점도계(Canon-Fenske size 200-350, Cannon Instrumment Co., State College, PA, USA)를 이용하여 점도를 측정하였 다. 즉, 일정량(10 mL)의 시료액을 점도계에 넣고 20분간 열평형 시킨 다음 시료 액이 유하하는 시간을 측정하여 점 도를 구하였다. 시료의 상대점도는 위의 방법을 이용하여 측정한 유하시간과 밀도를 식 (1)에 대입하여 구하였다.
여기서, ηref(reference viscosity)와 ηsample은 각각 glycerol의 절대점도(ηref)와 시료용액의 상대점도(ηsample 또는 ηrel)이고, ρref와 ρsample은 각각 glycerol 및 시료용액의 밀도이며, tref 및 tsample은 glycerol과 시료용액의 유하시간이다.
비점도(ηsp(specific viscosity))와 환원점도(ηred(reduced viscosity))는 위에서 구한 시료용액의 상대점도로부터 각각 (2) 및 (3)에 의하여 구하였다.
C는 시료의 농도(g/dL)이며, 고유점도는 식 (4)의 Huggins 식(Krigham & Flory, 1953)에 의하여 산출하였다.
여기서 [η]는 시료의 고유점도이고 K'은 Huggins상수이다. 시료농도에 대한 환원점도를 도시하여 얻어지는 직선의 절 편 및 기울기 값으로부터 각각 [η]와 K'[η]2을 구하였으며, 이로부터 고유점도와 Huggins 상수를 구하였다. 고유점도 의 측정은 3회 반복하여 측정하였으며 결과 값의 표준편차 는 ±1.5-2.8의 범위에 있었다.
Biopolymer 시료용액의 chain stiffness는 식 (5)의 Smidsord 와 Haug의 식(Smidsord & Haug, 1971)에 의해 계산하였다.
(A1은 상수 B는 chain stiffness, [η]0.1은 이온강도 0.1M NaCl 용액에서의 고유점도, Cs는 NaCl 농도이다)
Biopolymer의 coil overlap parameter(C*·η)는 Morris와 Ross-Murphy의 방법(Morris & Ross-Murphy, 1981)에 따라 Log ηsp와 Log C·η 관계의 기울기가 서로 달라지는 두 직 선의 변곡점에 일치하는 Log C*·η 값으로 부터 산출하였다.
Biopolymer 유동특성에서 온도의존성에 대한 활성화 에 너지는 식 (6)의 Arrhenius식에 의하여 계산하였다.
여기서 η는 고유점도(intrinsic viscosity, dL/g), Ao는 빈도 인자(frequency factor, dL/g), Ea는 활성화 에너지(activation energy, Kcal/g·mol), R은 기체상수(gas constant, Kcal/ g·mol·K), T는 절대온도(absolute temperature, K)이다. 즉, logη와 log 1/T(K-1)의 직선관계로부터 직선의 기울기(−Ea/ 2.303R)를 구하여 이로부터 활성화 에너지를 계산하였다 (Morris et al., 1980a).
Crude biopolymer 시료에 증류수를 가하여 0.25-1% 농 도범위의 현탁액을 만들고 1N NaOH 또는 1N HCl로 pH 를 조절하여 시료 액으로 하였다. 한편 염류는 NaCl과 CaCl2를 사용하여 농도별로 시료 액에 첨가하여 조제하 였다.
시료 액의 rheology 측정은 회전점도계인 Haake Rotovisco RV 100 (Haake Buchler Instruments Inc., Saddle Brook N.J.) 을 사용하여 다음과 같이 측정하였다. 측정용 컵에 시료 액을 40 mL를 넣고 측정온도를 4-80ºC 범위의 일정온도를 유지한 온도조절 용기에서 10분간 열평형 시킨 후 0-50 rpm의 회전속도 변화에 따른 항복응력(shear stress, Pa), τ 의 변화를 자동기록 하였다.
Rheology 특성 값은 Herschel-Bulkley (Kim et al., 1990, Lee et al., 1992)의 식 (7)식을 이용 하였는 데, 식 (7)에 대수를 취하여 식 (8)를 얻은 다음, log D=0일 때의 절편 값과 직선의 기울기로부터 특성값을 구하였다. 항복응력 (τy, yield stress)은 Casson model 식(Yoon & Goo (1994)) 인 식 (9)로 부터 계산하였다.
여기서 τ는 전단력(shear stress, Pa), τy는 항복응력(yield stress, Pa), D는 전단속도(shear rate(1/s)), K는 점조도지수 (consistency index, Pa·sn), n은 유동거동지수(flow behavior index, n)이다.
증류수와 대두유의 1:1 혼합물에 0.3%의 시료고분자, xanthan, sodium alginate 및 tween 80을 각각 첨가하여 상 온에서 30분 간 균질화하여 각각의 유화액 10 mL를 시험 관에 취해 시간경과에 따른 유화 안정성을 시험관 유화액 길이(cm)에 대하여 분리된 길이(cm)의 비율로 판단하였다 (Tako et al., 1977).
중금속 중 카드뮴(Cd)의 제거능은 Cd++ 5 ppm 용액 40 mL에 Biopolymer 0.2% 용액 10 mL를 첨가한 후 35ºC에 서 250 rpm으로 진탕하면서 평형에 이를 동안 실시한 후, 침전물을 12,000 rpm에서 원심분리하여 제거하고 상등 액 에 남은 Cd++의 양을 측정하였다. Cd++의 양은 microwab digestion system (Prolabo Co., France)에서 황산과 질산으 로 전 처리한 액을 증류수 50 mL로 정용한 다음 ICP-MS (ELAN 6100 DRC II, PerkinElmer, Waltham, MA, USA) 를 사용하여 214.438 nm의 파장에서 분석하였다. 표준시약 은 1,000 ppm (Accustandard, New Haven, CT, USA)의 Cd 용액을 사용하였으며 시료의 이동과 분석에는 아르곤 가스를 사용하였다.
결과 및 고찰
IPA로 정제하고 투석한 고분자의 농도에 따른 환원점도 (reduced viscosity)의 변화는 Fig. 1과 같으며, 본 실험의 고유점도의 측정에 대한 정확성을 검증하기 위해 20 dL/g 로 보고된 xanthan gum (Rinaudo & Milas, 1978)도 함께 측정하였다. Huggins 식에 의하여 y절편 값으로 부터 산출 한 고유점도 값은 biopolymer가 35.18 dL/g으로, 측정한 xanthan gum의 19.32 dL/g의 고유점도 값보다 큰 값을 나 타내었다. 본 biopolymer의 고유점도를 여러 다당류들과 비교해보면 guar (15-19.2 dL/g), CMC (14.4 dL/g), locust bean (16 dL/g) (Elfak et al., 1977;Rao et al., 1981), sodium alginate (31 dL/g)의 다당류들보다는 큰 값이었고, NaCMC (125 dL/g), κ-carrageenan (42 dL/g) (Elfak et al., 1977), gellan (39.4 dL/g), wellan (137.4 dL/g), rhamsan (88.5 dL/g) (Rinaudo & Milas, 1978)의 다당류들 보다는 작은 값의 범위였다.
투석(dialysis)을 행하고 정제한 고분자의 pH에 따른 고 유점도의 변화를 살펴본 결과를 Fig. 2에 나타내었다. 고유 점도는 중성 pH에서 가장 높은 값을 보였고 산성 및 알칼 리성 부근에서는 급격한 감소를 보였다. 일반적으로 대표 적인 산성고분자인 xanthan gum은 구성당 잔기의 pyruvic acid의 pH가 3으로서 3이하의 pH에서는 이온화가 되지 않 아서 정전기적 반발이 일어나지 않아 사슬의 신장을 일으 키지 않기 때문에 점도가 급격히 감소하는 것으로 알려져 있다(Rinaudo & Milas, 1978). 17.5%의 uronic acid를 보 유하고 있는 본 biopolymer도 중성 pH 부근에서 산성고분 자 임을 나타내는 가장 높은 고유점도 값을 보였다. 고유 점도에 대한 biopolymer의 NaCl 농도의 영향을 살펴본 결 과는 Fig. 3과 같다. 0.005M의 NaCl 농도에도 급격한 점 도의 저하를 보여 대부분의 다가전해질의 산성고분자와 비 슷한 특성을 나타내었으며 NaCl 농도의 증가에 따라 고유 점도가 감소하는 경향을 보였다. Lang과 Rha(1981)는 염이 다가전해질을 차폐(shielding)시키기 때문인 것으로 설명하 였으며 Nakamura 등(1987)도 다가 고분자 전해질은 charge 이온들 사이에 정전기적 반발이 존재하여 비이온성 고분자 보다 더 팽창된 구조를 가지는데 용액의 이온강도가 증가 함에 따라 반발이 감소하여 점도가 감소한다고 하였다.
NaCl의 농도(Cs-1/2)에 따른 고유점도 값의 변화를 Fig. 4 에 나타내었다. 직선의 기울기로부터 chain stiffness B값을 구한 결과 0.55이었으며, 다른 다당류들과 비교하여 Table 1에 나타내었다. Lang 등(1982)의 보고에 의하면 다가전해 질 다당류의 Chain stiffness 특성 값은 0.05-0.24 범위이며 이 값이 작을수록 rigid rod 한 형태를 가지고 클수록 flexible 하다고 하였다. 따라서 본 biopolymer의 사슬형태 는 기존의 다당류 보다 flexible 할 것으로 판단되었다.
Biopolymer의 coil overlap parameter C*·[η]를 구하기 위하여 log ηsp와 log C·[η] 관계를 Fig. 5에 나타내었다. Fig. 5의 변곡점으로 부터 구한 coil overlap parameter 값 은 0.722였으며 이로부터 구한 임계농도(C*)는 0.15 dL/g 이었다. 다당류들에 대한 coil overlap parameter (C*·[η]) 값들은 3-6의 범위(Morris et al., 1980b)로, 본 연구에서의 biopolymer의 coil overlap parameter (C*·[η])값은 보고된 값들보다 작았다. 임계농도(C*)는 welan gum의 0.056 g/dL, xanthan gum의 0.024 g/dL, rhamsan gum의 0.025 g/dL (Launay et al., 1986;Hwang & Shin, 2000;Jampen et al., 2000)의 값들 보다는 큰 값이어서 분자 개개의 물리적 접촉으로 일어나는 entanglement의 시작은 이러한 다당류 들보다는 높은 농도에서 시작될 것으로 판단되었다.
4ºC에서 80ºC까지의 온도범위에서 log(η)와 1/T의 관계 를 Fig. 6에 나타내었다. 50ºC를 전후로 9.55, 3.55 Kcal/ gmol의 서로 다른 활성화 에너지를 나타내었다. Tako 등 (1977)은 두 가지의 직선관계는 굴절점에서 다당 분자사슬 의 입체구조가 변화하기 때문이라고 하였다. 본 biopolymer 의 경우도 50ºC에서 분자사슬의 입체구조가 달라질 것으로 예상되었다.
0.5%(w/w) 용액의 농도에서 biopolymer, guar gum, xanthan gum, carrageenan gum을 20ºC에서 회전점도계로 전단속도(shear rate, D) 0-105 s-1에 따른 전단 응력의 변화 를 측정한 결과를 Fig. 7(A)에 나타내었다. Carrageenan gum은 원점을 지나면서 직선에 가까운 뉴우튼 유체(newton fluid)로서 거동하였고 biopolymer와 guar gum과 xanthan gum은 비뉴우튼 유체(pseudoplastic fluid)의 거동을 나타내 었다. 다당류에 당 잔기가 결합되어있는 경우는 뉴우튼 유 체의 거동을 보이며, 당 잔기가 없는 선형구조로 되어있는 다당류의 경우는 비뉴우튼 유체의 거동을 보인다고(Tako et al., 1977) 알려짐에 따라 본 biopolymer는 guar gum과 xanthan gum처럼 당 잔기가 결합되어 있을 것으로 판단되 었다. 또한 Casson 식에 따라 항복응력(yield stress, τy)을 구한 후 시료의 전단응력에서 항복응력을 뺀 차이 값과 전 단속도(shear rate)와의 관계를 Fig. 7(B)에 나타내었다. 또 한 Herschel-Bulkely 식에 의해 0.25%, 0.5% 농도의 용액 에서의 기울기와 logD = 0 일 때의 절편 값으로부터 각각 유동거동지수(n) 값과 점조도지수(K) 값을 계산하여 Casson 식으로부터 계산한 항복응력 값(τy)과 함께 Table 2에 나 타내었다. 시료들은 0.5% 농도에서는 전단속도 11.7 s-1를 기점으로 0-11.7 s-1의 범위와 11.7-105.3 s-1의 범위로 나뉘 어져 carrageenan gum을 제외하고 모두 2개의 직선관계를 갖는 비뉴우튼성 유동을 보였으며 0.25% 농도의 다당류들 은 xanthan gum 만이 11.7 s-1을 기준으로 2개의 직선관계 를 보여 xanthan은 0.25%의 농도에서도 비뉴우튼성 유동 을 보임을 알 수 있었다. 이러한 기울기의 변화는 전단속 도의 증가에 따른 응집구조의 파괴로 인한 shear thining 현상으로 보고(Tako et al., 1977)되고 있으며, 이 shear thinning은 비대칭분자의 배향성이 증가하거나 flexible 한 분자들의 형태변화 및 분자 간 인력 등의 요소들 때문으로 생각되고 있다. 또한 입자간 2차 결합력 등의 구조형성 능 과 관련을 갖는 항복응력값(τy)은 xanthan gum, biopolymer, guar의 순이었으며 점조도지수(K) 값은 0.5%의 농도 일 때 본 biopolymer가 660.39 mPa·s로 실험한 다당류들 중 가장 큰 값을 나타내었다. Lee 등(1996)은 고분자 용액의 항복 응력 값은 입자간 2차 결합력 등 구조형성능력과 밀접한 관련을 갖는 값으로, 고분자 용액의 농도가 증가할수록 분 자간의 엉킴 밀도가 증가하고 이러한 엉킴의 정도에 따라 외부에서 가해지는 힘에 대한 반응이 다르게 나타나게 되 어 분자간의 엉킴 밀도가 커짐에 따라 항복응력 값도 증가 하는 것으로 설명하고 있다. 또한 유동지수 n 값은 농도가 높아질수록 0.85-0.69로 점차 감소하여 농도가 높을수록 의 가소성이 강해지는 경향을 보이는 데, 고분자 분자사슬의 농도증가에 따른 엉킴 밀도 증가 하여 고분자의 분자사슬 의 운동성이 방해된다고 하였다. 식감에 대한 유동지수(n) 와의 관련성에 있어서 Szczesniak과 Farkas(1962)는 유동지 수 n 값이 높을수록 입안에서 slimsy 한 느낌을 받으며 유 동지수 n 값이 낮을수록 clean mouth feel을 느낀다고 하였 다. 본 biopolymer의 유동지수 n값은 전단속도 11.7 s-1의 전 후로 0.765, 0.43으로 guar gum과는 유사하나 xanthan gum 보다는 높은 값으로 다소 입안에서 clean mouth feel 을 느끼게 할 것으로 생각되어진다. 또한 biopolymer는 0.75% 이상의 농도에서는 상온에서 증류수에 용해하는 것 만으로도 gel을 형성하는 독특한 성질을 보였다.
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고분자 다당류의 온도에 대한 겉보기 점도의 변화를 살 펴보기 위하여 0.5% 농도에서 biopolymer, xanthan gum, guar gum 용액을 4-80ºC의 온도범위에서 회전점도계를 이용하여 전단속도 58.5 s-1에서 겉보기 점도를 측정한 결 과를 Fig. 8에 나타내었다. Fig. 8에서 볼 수 있는 바와 biopolymer는 온도변화에 안정한 xanthan gum과 겉보기 점도가 감소하는 guar gum보다도 겉보기 점도의 감소폭이 온도가 증가함에 따라 확연하게 컸다. 이와 관련된 활성화 에너지의 값(9.55 Kcal/g.mol (Fig. 6))도 sodium alginate (5.0 Kcal/g.mol) 및 locust bean gum (6.87 Kcal/g.mol) (Tako et al., 1977)보다도 큰 값이어서 온도에 대한 의존성이 높음 을 알 수 있었다. 또한 본 연구의 biopolymer는 농도 0.5%(w/w)에서 4-80ºC의 실험온도범위에서 낮은 온도범위 인 4ºC에서는 약한 gel을 형성하는 특성도 보였다.
고분자 다당류 0.5%(w/w)의 농도에서 biopolymer, guar gum, xanthan gum의 전단속도(D) 58.5 s-1에서의 겉보기 점 도에 대한 pH의 영향을 Fig. 9에 나타내었다. Guar gum과 xanthan gum은 pH의 변화에 따라 겉보기 점도의 변화가 거의 없으나 본 biopolymer는 pH가 낮아질수록 겉보기 점 도가 증가 하는 경향을 보였으며 pH 3에서 약한 gel을 형 성하면서 급격한 점도의 증가현상을 보였다. 이러한 현상 은 CMC, sodium alginate 등의 대부분의 산성고분자가 산 성 및 알칼리성에서 점도가 감소하는 경향과 다른 경향이 었다. 이러한 겉보기점도의 결과는 고유점도실험에서 산성 에서 분자상호간 전기적 반발의 감소로 점도가 감소하는 경향과는 다르게 나타난 현상으로, Morris 등(1980a)의 hyaluronic acid 결과와 유사한 특이한 경향이었다.
고분자 다당류 0.5%(w/w)의 농도에서 biopolymer, guar gum, xanthan gum의 전단속도(D) 58.5 s-1에서의 겉보기 점 도에 대한 염류의 영향을 살펴본 곁과는 Fig. 10(A, B)과 같다. 중성당인 guar gum은 NaCl 첨가에서 거의 영향을 받지 않았으며 음이온 다당류인 본 biopolymer와 xanthan gum은 NaCl 0.3%의 농도범위까지 점도상승현상을 보였으 며 그 이상의 농도의 염에서는 점도가 감소하는 경향을 보 였다. 또한 biololymer는 염 첨가 시 gel을 형성하는 독특 한 성질을 보였다. 또한 CaCl2 첨가의 경우에서는 guar gum과 xanthan gum 모두 겉보기점도의 변화가 없었고 본 biopolymer만 NaCl 첨가 때와 유사한 경향을 보였다. Peter와 Francis (1961)는 고체고분자 분말이 액체에 더해 져 평형이 되었을 때 aggregation의 평균상태는 용매에 영 향을 받지 않는 상태(state I)와 부분적으로 swollen 된 상 태(state Ia, Ib)와 높은 점도를 나타내는 부분적으로 분산 된 상태(state IIa)와 중간정도의 점도를 나타내는 완전 분 산된 상태(state III)가 될 가능성이 높다고 하였다. CMC의 경우 0.5와 1% 범위의 농도로 NaCl을 첨가하였을 때 state II 상태에 도달하여 10배의 viscosity를 나타내었고 더 높은 NaCl 농도에서는 state Ib로 전환하여 aggregate binding force가 강해 부피감소로 인하여 점도가 감소하는 경향을 나타낸다고 하였다. 따라서 본 biopolymer의 경우 도 aggregation의 평균상태가 0.3% NaCl 농도범위 이상에 서는 State II에서 State Ib로 전환하여 점도가 감소하는 것 으로 판단하였다. 또한 본 biopolymer의 유동거동에 대한 당류에 대한 영향을 살펴보기 위하여 glucose, fructose, sucrose의 농도 20%와 40%에서의 겉보기 점도를 비교한 결과를 Fig. 11에 나타내었다. Fig. 11에서 볼 수 있는 바 와 같이 glucose와 fructose를 첨가한 시료 군에서는 겉보 기 점도가 감소하는 경향을 보인 반면 sucrose를 첨가한 경우에는 겉보기 점도가 증가하는 현상을 보였다. 음이온 다당류 고분자용액의 점도는 sugar에 의해 영향을 받으며 (Francis, 1961) K-carrageenan과 Na-CMC는 다소 점도가 감소하나 pectin은 sucrose 첨가에서 겉보기 점도의 증가를 보이는 데 당과 polymer 분자들의 수소결합 때문인 것으 로 해석된다(Attia et al., 1979;Chen & Joslyn, 1967). 보 통 당의 첨가 시 점도의 증가는 sugar와 polysaccharide 사 이의 수소결합에 기인하는 데(Furuuchi et al., 1968), 점도 의 감소는 polymer 분자의 hydration과 extention을 제한하 여 solute-solute 상호작용의 수를 감소시키는 것으로 알려져 있다(Nakagaki & Kawamura, 1964;Carlson & Ziegenfuss, 1965). 본 biopolymer의 경우도 glucose와 fructose를 첨가 하였을 때 점도가 감소하는 것은 분자들의 hydration과 extention의 감소로 해석된다.
유화 안정성을 시험해 본 결과, 증류수와 대두유의 대조 군의 경우 30분 정도 경과 후 물과 기름 층이 뚜렷이 구 분되었다. Tween 80을 첨가하였을 때의 유화안정성은 21 시간 후 74% 정도 분리되었으며 45시간 후에는 100% 분 리되는 현상을 나타내었다. Guar gum을 첨가한 경우 24시 간 후에 74% 정도 분리되었으며 72시간 후에 완전히 분 리되었다. Arabia gum의 경우도 24시간 후에 74% 분리되 었고 48시간 후에 완전히 분리되었다. Xanthan gum과 본 biopolymer의 경우는 3주 이상 지난 시점까지 층의 분리가 관찰되지 않아 두 시료 모두 유화안정성이 높음을 알 수 있었다. 한편, 중금속인 Cd++에 대한 biopolymer의 제거효 과를 확인한 결과 본 biopolymer는 응집보조제인 CaCl2의 첨가 없이도 약 73% 정도의 제거효과를 나타내었다.
요 약
미생물 Bacillus polymyxa YU-101이 생산하는 biopolymer 의 기능성 탐색 및 용도개발을 위하여 물성학적 특성을 조 사하였다. Biopolymer의 고유점도는 35.18 dL/g이었으며, 0.005M의 NaCl의 농도에서도 급격한 고유점도의 감소를 보이는 산성고분자의 특성을 나타내었다. Biopolymer의 chain stiffness 값은 대단히 flexible 할 것으로 예상되는 0.55이었으며, coil overlap parameter 및 임계농도는 각각 0.722 및 0.15 dL/g 이었다. 고유점도에 따른 biopolymer의 활성화 에너지는 온도 50ºC에서 서로 다른 두 개의 직선 관계를 나타내었다. Biopolymer는 전단속도의 증가에 따라 비뉴우튼 유체인 의가소성의 유동특성을 나타내었다. 0.5%(w/w)의 농도에서 점조도지수(consistency index)는 660.39 mPa·S로 다당류들보다 높은 편이었으며, 유동지수 (flow behavior index)는 전단속도 0-11.7 s-1과 11.7-105.3 s-1 의 범위에서 각각 0.765와 0.4로 guar gum과 유사하였다. 전단속도 58.5 s-1에서 pH의 변화에 따른 biopolymer의 겉 보기 점도는 guar gum과 xanthan gum과는 달리 산성의 조건에서 급격한 점도증가 현상을 보였다. 또한 염(NaCl과 CaCl2)이 첨가된 조건에서 biopolymer의 겉보기 점도는 염 0.3%(w/w) 농도까지 점도가 증가하면서 겔을 형성하였으 며, 0.3%(w/w)의 농도보다 높은 농도에서는 점도가 감소하 는 경향을 보였다. Biopolymer의 겉보기점도에 대한 당 (glucose, fructose, sucrose)의 영향은 sucrose에 대해서만 점도가 증가하는 현상을 보였다. Biopolymer의 유화안정 성은 3주이상 안정한 결과를 보였으며, 중금속제거능도 응집보조제인 CaCl2의 첨가 없이도 약 73%의 제거효과를 보였다.
